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超(chāo)聲(shēng)波(bō)細胞粉碎(suì)機實(shí)驗案例(lì)及應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2024-11-13 來(lái)源:新芝生(shēng)物 瀏覽量:0
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產品說明

  SCIENTZ-IID超聲波細(xì)胞粉碎(suì)機(jī)是(shì)一款利用(yòng)超聲波的空化效應對實驗樣品進行處理的多功(gōng)能(néng),多用途(tú)儀(yí)器。它適用(yòng)於100μl-600ml容量的樣本(běn),具有超聲時間,功率連(lián)續可(kě)調(tiáo)等優(yōu)勢,能(néng)夠破碎(suì)各類(lèi)動(dòng)植物組織,細胞,細(xì)菌,同時可用來乳化,分(fēn)離(lí),分散(sàn),提(tí)取(qǔ)及(jí)加速化學反(fǎn)應等等。廣(guǎng)泛應用於生命科學(xué),材料(liào)科(kē)學(xué)和(hé)環(huán)境保護等領域。

產品(pǐn)特點

產品(pǐn)特(tè)點

應(yīng)用(yòng)領域

生物工程:細胞(bāo),細菌(jūn),病(bìng)毒,孢(bāo)子及其他細(xì)胞(bāo)結構(gòu)的(dí)破碎(suì);高(gāo)通(tōng)量(liáng)測序及染(rǎn)色(sè)質免(miǎn)疫(yì)沉澱中DNA片段化的製備;

食(shí)品工程(chéng):超聲(shēng)波對飲料的均(jūn)質;對(duì)酒的醇(chún)化(huà)一催陳(chén)技術;加(jiā)速溶解,加速(sù)化(huà)學(xué)反應,例(lì)如用於油(yóu)脂的加工(gōng);

環(huán)境(jìng)工(gōng)程:均質土壤,岩石(shí)樣品(pǐn);研(yán)究(jiū)岩石(shí)的結構(gòu)特(tè)征(zhēng)及物理學(xué)特征(zhēng);

生(shēng)物製藥:注射用(yòng)醫(yī)藥物(wù)質的分(fēn)散;中(zhōng)草藥的(dí)分(fēn)散(sàn),萃(cuì)取;碳(tàn)納(nà)米管,稀土(tǔ)材(cái)料(liào)等顆(kē)粒物的(dí)裂解,乳(rǔ)化,均質及(jí)破(pò)碎;

部分參考(kǎo)文獻

  西南交(jiāo)通(tōng)大(dà)學(xué)的Yinfen Cheng等人通(tōng)過(guò)新芝SCIENTZ-IID超聲波(bō)細(xì)胞粉碎機(jī)將(jiāng)水熱(rè)製(zhì)備(bèi)得到的(dí)In2S3微(wēi)球(qiú)剝(bāo)離成二(èr)維單晶胞(bāo)厚(~3nm)納(nà)米薄片(piàn),同時(shí)將(jiāng)N摻雜劑(jì)插(chā)入晶格中製(zhì)備獲得(dé)3D氮摻雜(zá)In2S3微(wēi)球(qiú),並(bìng)在室(shì)溫下發現3D氮摻雜In2S3微(wēi)球對10ppm NO2表現出(chū)15%的響應幅度,可見將二維摻雜金(jīn)屬(shǔ)硫(liú)化物及(jí)其(qí)衍(yǎn)生物用於高性(xìng)能(néng)室溫氣(qì)體傳感(gǎn)器(qì)的(dí)可能性(xìng)。

  In2S3微(wēi)球是(shì)使(shǐ)用水熱反應(yīng)合(hé)成的(dí)。簡(jiǎn)而言之,將(jiāng)0.22g InCl3•4H2O和0.15g硫代乙酰胺(àn)溶(róng)解(jiě)在40mL去(qù)離(lí)子(zǐ)水(shuǐ)中(zhōng)。劇(jù)烈攪(jiǎo)拌(bàn)30分(fēn)鐘形成透明溶液(yè)後(hòu),將(jiāng)混合(hé)物放入50mL高壓(yā)釜(fǔ)中,在160℃加(jiā)熱16小(xiǎo)時。反應(yīng)完(wán)成(chéng)後(hòu),高(gāo)壓釜(fǔ)自然冷卻至室溫。將獲得的橙(chéng)色溶液轉(zhuǎn)移到(dào)燒杯(bēi)中(zhōng)並通過(guò)新(xīn)芝SCIENTZ-IID超聲(shēng)波(bō)細(xì)胞(bāo)粉碎機在400W下進(jìn)行3小(xiǎo)時(shí)的探頭式(shì)超聲(shēng)處理。通(tōng)過在(zài)4000rpm下離心30分(fēn)鐘來分(fēn)離分(fēn)散(sàn)體。然(rán)後將(jiāng)20ml上清液(yè)稀釋到(dào)乙(yǐ)醇溶液中(zhōng)以增加(jiā)材料的分散(sàn)性。最終產物含(hán)有(yǒu)大約0.125mg/mL的N摻(chān)雜(zá)In2S3。合(hé)成過(guò)程(chéng)示(shì)意(yì)性(xìng)地(dì)顯示在圖S1中(zhōng):

部分(fēn)參考(kǎo)文(wén)獻(xiàn)

  南開大學的Yaqin Ji等人(rén)共采集天津地區(qū)食品(pǐn)(大米,饅頭,蔬(shū)菜(cài),肉(ròu)類,家(jiā)禽(qín),魚(yú),奶,水果(guǒ)),環(huán)境PM10,飲用水,土(tǔ)壤(rǎng),室(shì)內(nèi)PM10,室內(nèi)粉塵等448個(gè)樣(yàng)品(pǐn),采用(yòng)寧波(bō)新芝的(dí)SCIENTZ-IID超(chāo)聲(shēng)細胞粉碎機以10mL正(zhèng)己(jǐ)烷萃(cuì)取(qǔ),確(què)定(dìng)了(liǎo)6種(zhǒng)優先(xiān)鄰苯二甲酸(suān)酯(zhǐ)的分(fēn)布情(qíng)況(kuàng)。PAEs並(bìng)評估(gū)人(rén)類對它們的暴(bào)露。

  稱(chēng)取5g新鮮食品到(dào)25mL玻(bō)璃管中,用(yòng)寧(níng)波新芝(zhī)的(dí)SCIENTZ-IID超聲細胞粉(fěn)碎機(jī)以(yǐ)10mL正(zhèng)己烷(wán)萃取(qǔ)。將漿料(liào)振搖10分鐘後分(fēn)離混合(hé)物,並(bìng)以3500rpm的轉(zhuǎn)速離心(xīn)5分(fēn)鐘(zhōng)。然後通(tōng)過(guò)Florisil相(xiāng)萃取(qǔ)(SPE)淨(jìng)化(huà)合(hé)並(bìng)的萃取(qǔ)物(wù)。加(jiā)入已知(zhī)量(liáng)的內標後,溶(róng)液在(zài)溫和的氮氣流下用二(èr)氯甲(jiǎ)烷濃(nóng)縮(suō)至最終體(tǐ)積(jī)為2mL。

部分(fēn)參(cān)考文獻

  由於其(qí)固有的(dí)高(gāo)親核(hé)性,半(bàn)胱(guāng)氨酸在(zài)所有蛋白質編碼氨基(jī)酸中是(shì)獨(dú)一無二的。半胱氨酰(xiān)硫(liú)醇基團可(kě)以通(tōng)過廣泛的氧化(huà)還原機製或(huò)通過衍(yǎn)生自外源(yuán)或(huò)內(nèi)源來(lái)源(yuán)的(dí)各種(zhǒng)親電(diàn)子試劑進(jìn)行(háng)共價(jià)修飾。測量(liáng)蛋(dàn)白(bái)質半(bàn)胱(guāng)氨酸對(duì)氧化(huà)還(huán)原擾動或親(qīn)電體的(dí)反應(yīng),對於(yú)理解所(suǒ)涉(shè)及的潛(qián)在機製(zhì)至關(guān)重(zhòng)要(yào)。基(jī)於硫(liú)醇反應性(xìng)探(tàn)針(zhēn)的(dí)基於活性(xìng)的蛋白質分(fēn)析已成為此(cǐ)類分析(xī)的(dí)首(shǒu)選(xuǎn)方(fāng)法(fǎ)。

  因(yīn)此,北(běi)京(jīng)生(shēng)命科學研究(jiū)所(suǒ)的Ling Fu等人(rén)開發了(liǎo)一個新的化(huà)學蛋(dàn)白(bái)質(zhì)組學平台(tái),稱為“QTRP”(定量硫醇(chún)反應性(xìng)分析),在30W和(hé)20kHz下使用寧波新芝的SCIENTZ-IID超聲(shēng)波細(xì)胞粉碎機進(jìn)行(háng)聲(shēng)處理HEK293T細胞(bāo),通(tōng)過破壞(huài)細(xì)胞膜和(hé)破(pò)壞其他(tā)(亞)細胞結(jié)構從(cóng)沉澱細(xì)胞中(zhōng)提(tí)取(qǔ)蛋(dàn)白(bái)質,並還通過(guò)剪(jiǎn)切裂(liè)解樣品中的基(jī)因(yīn)組(zǔ)DNA來降(jiàng)低(dī)溶(róng)液(yè)的粘(nián)度(dù)。

  例(lì)如(rú),我(wǒ)們(mén)通(tōng)常(cháng)使用500μl的冷(lěng)凍裂解(jiě)緩衝液來裂解(jiě)從(cóng)10厘米(mǐ)的(dí)HEK293T細(xì)胞(bāo)培(péi)養(yǎng)皿中產生(shēng)的(dí)沉澱(diàn)細胞(bāo)。在30W和(hé)20kHz下使(shǐ)用(yòng)超聲探(tàn)頭(寧波(bō)新(xīn)芝的(dí)SCIENTZ-IID超聲(shēng)波(bō)細胞(bāo)粉碎(suì)機)進行(háng)聲(shēng)波處(chǔ)理(lǐ)。在冰上以(yǐ)5秒(miǎo)的(dí)間(jiān)隔以10秒的脈(mài)衝施(shī)加功率(shuài)3次。超(chāo)聲(shēng)處理用於通過(guò)破壞細(xì)胞(bāo)膜(mó)和(hé)破壞(huài)其(qí)他(tā)(亞)細(xì)胞結構(gòu)從沉澱細胞中提(tí)取蛋白(bái)質。它還通過(guò)剪(jiǎn)切(qiē)裂(liè)解(jiě)樣品中的基因組DNA來降低溶(róng)液(yè)的(dí)粘(nián)度(dù)。

實(shí)驗舉例(lì)

  暨南大學(xué)的(dí)公(gōng)顏慧等(děng)人(rén)用新(xīn)芝SCIENTZ-IID超聲波(bō)細胞(bāo)粉碎(suì)機在大腸杆菌(jūn)E.coliBL21(DE3)中(zhōng)實(shí)現酯酶EstP8的(dí)高效(xiào)異(yì)源表(biǎo)達和(hé)純(chún)化。

  將測序正(zhèng)確的重組質粒(lì)pET28(+)-EstP8轉入E.coliBL21(DE3)中(zhōng),將(jiāng)E.coliBL21(DE3)塗布到100mg/ml卡那黴素(sù)的LB平板(bǎn),37℃培養過夜後,挑取(qǔ)單(dān)菌落於含卡那(nà)黴素LB液體(tǐ)培(péi)養(yǎng)基中進(jìn)行培(péi)養(yǎng)。取(qǔ)樣測(cè)定菌體(tǐ)濃(nóng)度達到OD600為0.8左右(yòu)時,加入(rù)0.2mmol/L IPTG在22℃誘(yòu)導16~20h。4℃離心收(shōu)集(jí)菌體,用(yòng)預(yù)冷的50mmol/L pH 8.0的Tris-HCl緩(huǎn)衝(chōng)液衝(chōng)洗菌體並(bìng)重(zhòng)懸浮(fú),置(zhì)於冰(bīng)上(shàng)超(chāo)聲(shēng)破(pò)碎(suì),將(jiāng)破(pò)碎完的(dí)菌體裂解液在(zài)4℃下(xià)9000r/min離心30min,將10ml上清(qīng)轉(zhuǎn)移到(dào)50mmol/L的pH7.5的Tris-HCl緩衝溶(róng)液(yè)預先平(píng)衡的鎳柱(zhù)中,用(yòng)40mmol/L咪唑(zuò)緩(huǎn)衝溶(róng)液衝(chōng)洗雜(zá)蛋白(bái),用(yòng)300mmol/L的咪(mī)唑緩衝(chōng)溶液(yè)洗脫(tuō)目的蛋(dàn)白。得(dé)到(dào)的(dí)酶(méi)溶(róng)液用脫鹽柱(zhù)脫(tuō)鹽。取(qǔ)全菌體,上(shàng)清和沉澱用12%的SDS-PAGE進行凝膠電泳檢測(cè)。

  酯酶EstP8是(shì)一種新(xīn)型(xíng)的(dí)低溫微(wēi)生物酯酶,具(jù)有耐(nài)金屬離子,耐(nài)有機(jī)溶劑的(dí)特(tè)性(xìng);酯(zhǐ)酶(méi)EstP8能(néng)通過選擇性水解乙酸(suān)蘇(sū)合(hé)香酯來製備手性(R)-1-苯(běn)基(jī)乙(yǐ)醇,不同(tóng)有(yǒu)機溶劑的加入(rù)可以(yǐ)極大(dà)促進該(gāi)酯酶拆分的(dí)光學選擇(zé)性(xìng)和產率。酯酶(méi)EstP8具(jù)有(yǒu)良(liáng)好的產業化(huà)應用(yòng)前景。

  河南(nán)科(kē)技大學的Huiyun Zhang等人(rén)開發了(liǎo)一種(zhǒng)含有殼(ké)聚糖(táng)(CH) 和(hé)荊(jīng)芥精油(yóu)(STEO)的納米(mǐ)乳液基(jī)可(kě)食(shí)用(yòng)塗層(céng),並研(yán)究其(qí)塗(tú)層對(duì)在4±1°C條件(jiàn)下儲存16年的新鮮(xiān)豬肉的(dí)質量和(hé)保質(zhì)期的(dí)影(yǐng)響(xiǎng)。通過(guò)對含有0.5%,1%和2% (v/v) 的CH 和STEO的(dí)粗乳液(yè)進行超(chāo)聲乳(rǔ)化。特(tè)別是CH-STEO納米乳液(yè)塗(tú)層(céng)在肉(ròu)類(lèi)保(bǎo)鮮方(fāng)麵表(biǎo)現(xiàn)出(chū)最佳性(xìng)能,這(zhè)可能歸(guī)因(yīn)於其較小(xiǎo)的粒(lì)徑,增強的(dí)防腐(fǔ)功能(néng)和穩(wěn)定(dìng)性(xìng)。研(yán)究表明,負(fù)載活(huó)性(xìng)納米(mǐ)乳(rǔ)液(yè)的生(shēng)物聚(jù)合物(wù)可(kě)食(shí)塗(tú)層(céng)在鮮肉(ròu)保(bǎo)鮮方麵具(jù)有巨(jù)大潛力(lì)。

  CH-STEO納米(mǐ)乳液製(zhì)備(bèi)過(guò)程(chéng)中作(zuò)為(wéi)表(biǎo)麵(miàn)活(huó)性(xìng)劑的吐溫(wēn)-80預(yù)先(xiān)與STEO以(yǐ)1:1(v/v)的(dí)比(bǐ)例充分(fēn)混合(hé)。STEO和吐(tǔ)溫(wēn)-80的比例保(bǎo)持在1:1,因(yīn)為(wéi)如前(qián)所述,發(fā)現(xiàn)該比例(lì)高度穩(wěn)定(dìng),沒有(yǒu)任何(hé)相分(fēn)離,並且與(yǔ)其他(tā)油-表(biǎo)麵活(huó)性(xìng)劑(jì)比例相比,粒徑較低。進行了初(chū)步測試(shì)以確定(dìng)用於粗乳液製備的STEO的合(hé)適(shì)濃(nóng)度。當STEO的(dí)濃度(dù)大於2%時(shí),觀(guān)察(chá)到(dào)對乳液(yè)的感官質量(liáng)有顯著的(dí)負(fù)麵(miàn)影(yǐng)響。因此,為(wéi)了製備粗(cū)乳(rǔ)液(yè),在13,000rpm的(dí)磁(cí)力(lì)攪(jiǎo)拌下,將(jiāng)0.5%,1%和(hé)2%(v/v)的STEO逐(zhú)滴(dī)添(tiān)加到獲得的(dí)CH溶液中,持(chí)續5分(fēn)鐘。使(shǐ)用(yòng)超聲波均(jūn)質(zhì)器(SCIENTZ-IID,寧波(bō)新(xīn)芝)以20kHz的(dí)頻率(shuài)運(yùn)行(háng)6分鐘(zhōng),將粗乳(rǔ)液(yè)的粒徑減小以形成納米(mǐ)乳液。操作(zuò)功(gōng)率(shuài)調整(zhěng)為200W,超聲的(dí)實(shí)際(jì)功(gōng)率密(mì)度(dù)為0.29W/ml。探(tàn)頭放(fàng)置(zhì)在距裝有(yǒu)100ml樣品的燒杯(bēi)底部10mm處。脈(mài)衝持續時間(jiān)設(shè)置(zhì)為(wéi)5秒(miǎo)開啟時間和5秒(miǎo)關(guān)閉(bì)時間(jiān),同時在恒(héng)溫水(shuǐ)浴超(chāo)聲處(chǔ)理(lǐ)期(qī)間溶(róng)液(yè)的溫度(dù)保(bǎo)持恒(héng)定在25°C。

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