實(shí)驗背景(jǐng)：小(xiǎo)鼠(shǔ)脛骨是骨(gǔ)代(dài)謝
，骨疾(jí)病
，幹(gān)細(xì)胞及(jí)分(fēn)子(zǐ)生(shēng)物學研究中的(dí)重(zhòng)要組(zǔ)織樣(yàng)本。在 DNA
，RNA 提取
，蛋白(bái)定(dìng)量等檢測中(zhōng)，需將堅硬致(zhì)密的(dí)骨組織研(yán)磨成(chéng)均匀細膩(nì)的(dí)粉末(mò)，以(yǐ)充(chōng)分釋(shì)放(fàng)生(shēng)物分子。然而(ér)，骨(gǔ)組織(zhī)礦(kuàng)化程度高
，質地(dì)堅硬，傳統研磨方(fāng)式(shì)難(nán)以(yǐ)徹底(dǐ)破(pò)碎，且(qiě)易因(yīn)產(chǎn)熱導(dǎo)致核酸或蛋白(bái)質(zhì)降解(jiě)。本實驗(yàn)采用新(xīn)芝生物高通量組(zǔ)織研磨器(qì) SCIENTZ‑48L 對小鼠(shǔ)脛(jìng)骨進行(háng)幹磨(mó)處理(lǐ)，驗證(zhèng)其(qí)在常溫或低溫(wēn)條件(jiàn)下(xià)高效破碎(suì)骨(gǔ)組(zǔ)織(zhī)的能力(lì)。

傳統研磨方(fāng)法存在(zài)的(dí)痛點(diǎn)

　　組(zǔ)織堅硬難破(pò)碎(suì)：骨(gǔ)組織礦(kuàng)化(huà)程度高(gāo)
，質(zhì)地致密堅(jiān)硬，傳統研缽(bō)或手動(dòng)匀(yún)漿(jiāng)難(nán)以將其(qí)徹底(dǐ)破碎，常(cháng)殘留骨渣，影響生物(wù)分子釋放效率(shuài)。

　　成分易受熱(rè)降解(jiě)：研磨過程中產生的(dí)熱量易(yì)導(dǎo)致(zhì) RNA
，蛋白質等(děng)熱(rè)敏(mǐn)性(xìng)生物分(fēn)子(zǐ)降解，影(yǐng)響(xiǎng)後續 PCR
，Western blot 等檢測結果(guǒ)的準(zhǔn)確性。

　　易產生交叉汙(wū)染(rǎn)：傳統研磨工(gōng)具(jù)清洗繁瑣，多(duō)批(pī)次樣品(pǐn)處理時易造成樣(yàng)品(pǐn)間交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)，影響實驗可(kě)靠性。

　　處理(lǐ)效(xiào)率低下(xià)：手工研磨耗時費力，且(qiě)重(zhòng)復性(xìng)差，難以(yǐ)適應(yīng)高通量樣本處理(lǐ)需(xū)求(qiú)，製(zhì)約科研實驗進度。

實驗(yàn)準(zhǔn)備

　　實(shí)驗樣品：小鼠脛(jìng)骨(gǔ)組織

　　實驗(yàn)目(mù)的：驗證新芝生物高通量組織研(yán)磨器 SCIENTZ‑48L 對(duì)小(xiǎo)鼠脛(jìng)骨(gǔ)的(dí)破碎效果(guǒ)，確(què)保(bǎo)獲(huò)得均(jūn)匀細(xì)膩(nì)的骨(gǔ)組織粉(fěn)末，滿足(zú) DNA/RNA 提取
，蛋白分(fēn)析(xī)
，酶(méi)活性檢測(cè)等後(hòu)續(xù)分(fēn)子生物學實驗的要求(qiú)。

　　實(shí)驗(yàn)耗材(cái)：2ml離(lí)心(xīn)管
，6mm研磨珠2顆(kē)，3mm研(yán)磨珠(zhū)若幹(gān)

　　實(shí)驗設(shè)備：

冷凍型(xíng)高(gāo)通量組織(zhī)研(yán)磨(mó)器(qì)SCIENTZ-48L

實(shí)驗步(bù)驟

　　樣本(běn)準備：取新鮮或凍存小鼠(shǔ)脛骨組(zǔ)織(zhī)適量（約(yuē) 50–100 mg），剔(tī)除(chú)附(fù)著(zhuó)軟(ruǎn)組織後置於2 ml 離(lí)心管中。若進行(háng) RNA 提取，建(jiàn)議使用無(wú) RNA 酶的專(zhuān)用離(lí)心管(guǎn)，並全程低(dī)溫(wēn)操作(zuò)。

　　參數設(shè)置：研磨頻(pín)率(shuài)：60Hz,單次(cì)運行時(shí)間：60秒,循(xún)環(huán)次數(shù)：6次(cì),間歇(xiē)暫停：5秒,本實驗為幹(gān)磨，無需添加任(rèn)何(hé)溶(róng)劑。

　　進行(háng)研磨：將(jiāng)離(lí)心(xīn)管裝(zhuāng)入(rù)適(shì)配(pèi)器，對(duì)稱(chēng)配平後鎖緊(jǐn)艙門，啟動(dòng)研磨(mó)程序。設(shè)備(bèi)通(tōng)過高頻(pín)三(sān)維振(zhèn)蕩帶(dài)動研(yán)磨珠(zhū)高速撞擊(jī)
，剪(jiǎn)切骨組織，實(shí)現(xiàn)細胞(bāo)快(kuài)速(sù)破(pò)碎(suì)。

　　結(jié)束(shù)取(qǔ)樣(yàng)：研磨(mó)完成(chéng)後(hòu)，取出離(lí)心(xīn)管(guǎn)，即可獲得(dé)均匀細膩的(dí)骨(gǔ)組(zǔ)織(zhī)粉(fěn)末，無可(kě)見(jiàn)骨塊(kuài)殘(cán)留。

實驗結(jié)果(guǒ)

左：研磨前(qián) ; 右：研磨後

　　經高通(tōng)量組織研(yán)磨(mó)器(qì) SCIENTZ‑48L處理後，小鼠(shǔ)脛(jìng)骨由堅(jiān)硬(yìng)的骨組(zǔ)織轉變(biàn)為均匀細膩的粉末狀(zhuàng)，破碎(suì)充分，無肉(ròu)眼(yǎn)可(kě)見骨(gǔ)渣(zhā)殘留。經後續(xù)檢測(cè)，核酸完(wán)整(zhěng)性(xìng)良(liáng)好，蛋白(bái)質提取(qǔ)效(xiào)率顯著提(tí)升(shēng)，滿(mǎn)足(zú)分子生(shēng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)要(yào)求。

注意事(shì)項

　　01進(jìn)行 DNA
，RNA 或蛋白(bái)質提取時(shí)，建(jiàn)議(yì)使用預(yù)冷離心管，或采用(yòng)間歇循(xún)環模(mó)式(shì)，避免樣(yàng)品升溫(wēn)導(dǎo)致(zhì)生(shēng)物分(fēn)子降(jiàng)解。

　　02新(xīn)鮮組織建議(yì)采(cǎi)集後立即(jí)處理或(huò)快速凍(dòng)存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)影響樣品質量。

　　03裝樣(yàng)量不(bù)宜過多(duō)，以(yǐ)不超過離(lí)心(xīn)管(guǎn)容量(liáng) 1/3 為佳，確保(bǎo)研(yán)磨珠運動空(kōng)間充足。

　　04幹(gān)磨(mó)過程務(wù)必蓋緊管蓋(gài)，防(fáng)止(zhǐ)骨粉飛(fēi)濺
，泄漏或交叉汙染(rǎn)。

　　05骨組織硬(yìng)度(dù)較高(gāo)，優先(xiān)使(shǐ)用氧(yǎng)化鋯研(yán)磨珠(zhū)，提升(shēng)破碎效(xiào)果與耐用(yòng)性。

　　實(shí)驗結(jié)果(guǒ)表明，新芝生物(wù)高通量(liáng)組織(zhī)研(yán)磨(mó)器 SCIENTZ‑48L能(néng)夠(gòu)高效處(chǔ)理小(xiǎo)鼠脛骨這(zhè)類堅硬骨組織(zhī)，在(zài)低溫條件(jiàn)下(xià)實現細胞(bāo)的充分破(pò)碎，獲(huò)得均匀細(xì)膩(nì)的粉末樣品(pǐn)。該(gāi)方法操作簡便(biàn)
，重(zhòng)復性(xìng)好(hǎo)
，通量(liáng)高(gāo)，有(yǒu)效(xiào)避免(miǎn)了(liǎo)傳(chuán)統研(yán)磨方法中(zhōng)的(dí)產熱降解(jiě)和(hé)交叉(chā)汙染(rǎn)問題(tí)，顯著(zhù)提升(shēng)了(liǎo)生物(wù)樣品前處理的效率(shuài)與(yǔ)質(zhì)量(liáng)，適(shì)用(yòng)於(yú)分子(zǐ)生物(wù)學
，藥(yào)物研發(fā)
，病(bìng)理檢測及相關(guān)科研領(lǐng)域(yù)中的(dí)骨組織(zhī)樣(yàng)品(pǐn)製備環(huán)節。