今日(rì)給大(dà)家(jiā)分(fēn)享(xiǎng)一篇(piān)關(guān)於凍幹工藝對(duì)於(yú)益生菌(jūn)活(huó)力影響(xiǎng)的文章
。益生菌具有極大的開發(fā)應用(yòng)價值(zhí)
，其中乳(rǔ)酸菌(jūn)是典型(xíng)的代表
。高(gāo)效保存菌體活力(lì)有(yǒu)利於後續生產(chǎn)一直是困擾(rǎo)工業界的難題(tí)
。目前(qián)國內(nèi)外研究表明乳酸杆菌(jūn)在不(bù)利環境下會(huì)產生生理(lǐ)應(yīng)激反(fǎn)應(yīng)
，處(chǔ)於壓力(lì)條(tiáo)件下(xià)菌體內(nèi)部(bù)的蛋白(bái)質發生變(biàn)化
，以(yǐ)增強其(qí)適應性
。

　　為(wéi)探究凍(dòng)幹工(gōng)藝對於菌(jūn)種內(nèi)部(bù)分子機(jī)製的變化
，作(zuò)者(zhě)采用蛋白(bái)質(zhì)組(zǔ)學(xué)技術
，通過(guò)對(duì)於菌(jūn)體(tǐ)凍(dòng)幹前後(hòu)內部蛋白質的變化觀測
，來分析冷(lěng)凍幹燥工藝對(duì)菌(jūn)體存活的(dí)影(yǐng)響
，為其工業化生產(chǎn)提(tí)供理(lǐ)論依據
。作(zuò)者設(shè)定培養溫(wēn)度(dù)分別為(wéi)32.5℃與(yǔ)37℃
，對(duì)副幹(gān)酪乳杆(gān)菌PC-01高密(mì)度發(fā)酵(jiào)並冷(lěng)凍(dòng)幹(gān)燥
。取凍(dòng)幹(gān)前與凍幹後(hòu)的樣品
，利(lì)用TMT技(jì)術測(cè)定(dìng)蛋(dàn)白(bái)質含量(liáng)
，對鑒定出(chū)的(dí)差異蛋(dàn)白進(jìn)行KEGG功能注(zhù)釋與(yǔ)富(fù)集(jí)分析
，研(yán)究(jiū)蛋(dàn)白的差(chà)異(yì)表達對(duì)兩個(gè)試(shì)驗組(zǔ)菌體存活(huó)的影響
。

結果分(fēn)析

　　①不(bù)同(tóng)溫度對(duì)凍(dòng)幹前後(hòu)菌(jūn)種活(huó)性的(dí)影(yǐng)響具(jù)有(yǒu)差異(yì)
。通過(guò)對32.5℃和(hé)37℃實驗組(zǔ)凍幹(gān)前後菌體活細胞數的(dí)檢測
，發現凍幹前(qián)
，後32.5℃試驗組的活菌(jūn)數(shù)均顯著高於37℃試(shì)驗組(zǔ)
。說明(míng)32.5℃更(gēng)適合(hé)作為(wéi)凍(dòng)幹(gān)前(qián)培(péi)養溫度
。

　　②對(duì)鑒(jiàn)定(dìng)出(chū)的(dí)差(chà)異蛋白進行KEGG通路(lù)注釋(shì)與(yǔ)富集(jí)分析(xī)
，結(jié)果表明
，32.5℃試(shì)驗組(zǔ)中上(shàng)調(tiáo)差(chà)異(yì)蛋白顯著(zhù)富集於碳水(shuǐ)化合(hé)物(wù)代(dài)謝通(tōng)路與膜運(yùn)輸(shū)通(tōng)路
，在菌株生長(cháng)繁殖(zhí)過(guò)程中(zhōng)
，存在一些(xiē)具(jù)有(yǒu)代(dài)表(biǎo)性(xìng)的(dí)蛋(dàn)白質(zhì)
，如(rú)ECF轉(zhuǎn)運體(tǐ)S組(zǔ)分
，金(jīn)屬(shǔ)ABC轉運蛋白ATP結合蛋白(bái)和NADH過(guò)氧化物酶(méi)
。這些蛋白(bái)質(zhì)對(duì)於菌株(zhū)的(dí)生存至關重要
。其(qí)中(zhōng)ECF轉(zhuǎn)運(yùn)體(tǐ)S組(zǔ)分
，金(jīn)屬ABC轉運蛋(dàn)白(bái)ATP結合(hé)蛋(dàn)白(bái)的(dí)功(gōng)能(néng)均(jūn)與(yǔ)膜(mó)運(yùn)輸有關(guān)且結合的底物(wù)為金屬離(lí)子
，通過(guò)運(yùn)輸膜兩側的金屬(shǔ)離(lí)子(zǐ)來(lái)維持滲(shèn)透壓平(píng)衡
，從而維(wéi)持細(xì)胞結(jié)構(gòu)穩定
。另外(wài)
，NADH過(guò)氧(yǎng)化(huà)物(wù)酶在(zài)細胞內(nèi)分解氧化(huà)毒(dú)性物質(zhì)
，抵抗氧化(huà)應激(jī)方麵發揮著(zhuó)重要(yào)作用
。

　　由(yóu)此可得出
，當(dāng)副幹(gān)酪(lào)乳(rǔ)杆菌(jūn) PC-01 處(chǔ)於(yú)對(duì)自(zì)身不(bù)利的環境中時
，其(qí)內部(bù)蛋(dàn)白(bái)質(zhì)會(huì)立(lì)即(jí)作(zuò)出反(fǎn)應
，通過(guò)細胞(bāo)代謝和(hé)抵抗(kàng)外界環(huán)境(jìng)來形(xíng)成防(fáng)御(yù)機(jī)製(zhì)
，從而(ér)減少外界環境對菌種(zhǒng)活(huó)性(xìng)的損害(hài)
。

　　③經過(guò)綜合分(fēn)析(xī)兩個(gè)試(shì)驗(yàn)組的(dí)凍幹(gān)前後差異(yì)顯著(zhù)的蛋白(bái)
，發現在(zài)35℃試驗(yàn)組(zǔ)中(zhōng)
，一些關(guān)鍵蛋白在(zài)凍幹(gān)後(hòu)的表(biǎo)達量(liáng)明顯高於(yú)凍(dòng)幹前
，且整體表(biǎo)達量也高(gāo)於(yú)37℃試(shì)驗(yàn)組
。例如(rú)醛(quán)酮(tóng)還原酶蛋白
，其(qí)作(zuò)用(yòng)的(dí)底(dǐ)物範(fàn)圍(wéi)非常廣(guǎng)泛(fàn)
，包(bāo)括(kuò)糖類
，脂(zhī)肪(fáng)醛(quán)等(děng)
，還(huán)可以利(lì)用(yòng)輔酶(méi)參與羰基(jī)還(huán)原(yuán)
，碳碳(tàn)雙(shuāng)鍵(jiàn)還原
，內(nèi)酯還(huán)原和半縮(suō)醛氧(yǎng)化反應
，同(tóng)時也可參與(yǔ)不(bù)飽和(hé)脂肪(fáng)酸的(dí)合成和代(dài)謝(xiè)
。研究表明(míng)高比(bǐ)例的不飽和脂肪酸可以(yǐ)更好(hǎo)地維持(chí)菌株凍幹(gān)後的細(xì)胞(bāo)膜流動性(xìng)和完整性
。根(gēn)據推測(cè)
，35℃試驗(yàn)組中醛酮還原酶的(dí)表達(dá)量提(tí)高
，導致菌(jūn)株(zhū)不飽(bǎo)和脂肪酸的(dí)含量增(zēng)加
，增強了細(xì)胞膜(mó)的韌性(xìng)
，使(shǐ)其(qí)更(gēng)具流動性
，從(cóng)而提高了(liǎo)菌體細胞的(dí)抗(kàng)冷(lěng)凍性(xìng)
。這可能是32.5℃試驗(yàn)組比37℃試(shì)驗組更具活(huó)性的(dí)原因之一(yī)
。

總結(jié)

　　32.5℃是(shì)最(zuì)適(shì)合凍幹前後培養(yǎng)的(dí)溫(wēn)度
，凍(dòng)幹前後蛋白(bái)量多
，且(qiě)差異化(huà)大
。當(dāng)副幹酪(lào)乳杆菌(jūn) PC-01處於(yú)對自身(shēn)不(bù)利的環(huán)境(jìng)中時
，其(qí)內(nèi)部(bù)蛋白分子(zǐ)會(huì)立(lì)刻從細(xì)胞代謝及抵(dǐ)抗外(wài)界環境(jìng)這兩方麵作出(chū)反(fǎn)應(yīng)
，形成(chéng)防御機(jī)製(zhì)
，從而(ér)減弱外界(jiè)環境對菌(jūn)種(zhǒng)活(huó)性的損害程度
。關鍵蛋白(bái)表達(dá)上(shàng)調(tiáo)使菌(jūn)株(zhū)不飽(bǎo)和脂肪(fáng)酸的量增加(jiā)
，從(cóng)而增(zēng)強細胞膜的韌勁並可更(gēng)好地(dì)維持細胞(bāo)膜(mó)流動性(xìng)
，由此增大了菌(jūn)體(tǐ)細(xì)胞的抗冷凍性
。

　　正如前(qián)文所提到(dào)的(dí)
，冷凍幹燥(zào)對(duì)菌體活力的保持(chí)有著重(zhòng)要的影響(xiǎng)
。凍幹機作為(wéi)無菌生物製(zhì)劑(jì)的(dí)關(guān)鍵設備
，其(qí)各項性能指標與(yǔ)凍(dòng)幹產品的質量密切(qiē)相(xiāng)關
。因此(cǐ)
，使(shǐ)用適(shì)當(dāng)的(dí)儀(yí)器和正(zhèng)確(què)的工藝能夠幫助企業(yè)提高菌體的保(bǎo)存(cún)活(huó)力
，並(bìng)提(tí)升(shēng)後續生產效率
。新(xīn)芝(zhī)多(duō)年深耕真空冷(lěng)凍幹(gān)燥領(lǐng)域
，能(néng)夠(gòu)為(wéi)各位(wèi)用(yòng)戶(hù)提供合(hé)適(shì)的產(chǎn)品和解決方(fāng)案
。

鐘罩型(xíng)壓蓋式凍幹機(jī)

　　SCIENTZ-18N冷凍(dòng)幹燥機是(shì)SCIENTZ-N係(xì)列(liè)冷(lěng)凍(dòng)幹(gān)燥機中凍(dòng)幹麵積(jī)最(zuì)大
，捕(bǔ)水(shuǐ)能力最強
，冷阱(jǐng)尺(chǐ)寸最(zuì)大的機(jī)型
，它在(zài)保(bǎo)持(chí)結(jié)構緊湊的(dí)同時(shí)
，兼顧(gù)性能
。采(cǎi)用先進(jìn)的進(jìn)口壓(yā)縮機
，功能強(qiáng)大(dà)
，可提(tí)供高(gāo)度(dù)自(zì)動化(huà)的高品質(zhì)冷(lěng)凍幹燥環境（常規空(kōng)載-56℃
，可選配-80℃壓縮(suō)機
，捕水容量6kg）
，是(shì)中小型實驗室(shì)完(wán)成(chéng)較大(dà)批量
，多(duō)品(pǐn)種物料凍幹(gān)的(dí)理(lǐ)想(xiǎng)選擇
。

性(xìng)能(néng)特點

整(zhěng)體性能 結構緊湊
，功能強大

製冷係統 製(zhì)冷迅速
，清(qīng)晰(xī)可見

控製(zhì)係統 智(zhì)能控(kòng)製(zhì)
，真彩(cǎi)顯(xiǎn)示(shì)

幹(gān)燥室(shì) 透明(míng)密封(fēng)
，防(fáng)腐可(kě)靠(kào)

真空係(xì)統 真空(kōng)可控
，智能(néng)保護(hù)

T型架(jià)型(xíng)冷(lěng)凍幹燥機

　　SCIENTZ-25TK T型(xíng)架型(xíng)冷凍(dòng)幹燥(zào)機標配24隻(zhī)橡(xiàng)膠密(mì)封(fēng)閥
，可(kě)掛(guà)廣(guǎng)口瓶24隻(zhī)
，或(huò)茄型(xíng)瓶24隻
，並(bìng)采(cǎi)用了獨立的(dí)物料管道
，最(zuì)大程(chéng)度(dù)降(jiàng)低物(wù)料的相互(hù)交(jiāo)叉汙(wū)染風險
。緊(jǐn)湊的儀(yí)器結構設計
，可有(yǒu)效(xiào)節省(shěng)寶(bǎo)貴(guì)的實(shí)驗(yàn)室空間
。本機采用先進(jìn)的(dí)進口壓縮(suō)機
，功能強(qiáng)大
，可提供(gōng)高度自動(dòng)化(huà)的(dí)高品(pǐn)質冷凍幹燥環境(常(cháng)規(guī)空載-56℃
，可(kě)選配-80℃壓縮機)
，適用於(yú)對(duì)細(xì)菌
，真菌
，多肽樣品(pǐn)
，微(wēi)生(shēng)物菌(jūn)種的保(bǎo)藏(cáng)等樣(yàng)品(pǐn)的處理
。

性能(néng)特(tè)點(diǎn)

整體性(xìng)能 結構緊(jǐn)湊
，功(gōng)能(néng)強(qiáng)大

製(zhì)冷係統 製(zhì)冷(lěng)迅速(sù)
，清(qīng)晰可見(jiàn)

控(kòng)製(zhì)係統(tǒng) 智能(néng)控製(zhì)
，真彩(cǎi)顯示

幹(gān)燥室 透明密封(fēng)
，防腐可靠(kào)

真(zhēn)空係(xì)統(tǒng) 真(zhēn)空可控
，智能保(bǎo)護(hù)