實驗目(mù)的

　　為(wéi)了提⾼貯存穩(wěn)定性
，降(jiàng)低⼄醇殘留量，將(jiāng)卡巴(bā)他賽納(nà)⽶脂質體製(zhì)備(bèi)成凍⼲注射(shè)劑(jì)，並對(duì)凍(dòng)⼲⼯藝進(jìn)⾏了研(yán)究(jiū)與(yǔ)優化(huà)。以凍(dòng)⼲產品(pǐn)的(dí)外(wài)觀(guān)
，主(zhǔ)藥含量
，包(bāo)封率
，⽔分含(hán)量
，⼄醇殘留量(liáng)
，貯存穩定(dìng)性(xìng)為評(píng)價指(zhǐ)標，考(kǎo)察(chá)了凍⼲保(bǎo)護劑(jì) (蔗糖) ⽤量
，料(liào)液裝量
，預(yù)凍(dòng)速度
，⼲燥(zào)溫度(dù)對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的影(yǐng)響。

實(shí)驗步驟

凍幹(gān)保護(hù)劑的(dí)選(xuǎn)擇(zé)及用量(liáng)

　　凍⼲過程中會產⽣冰晶⽽破壞脂(zhī)質(zhì)體(tǐ)結構(gòu)。通(tōng)常(cháng)，為(wéi)了保(bǎo)護(hù)脂(zhī)質體的結構(gòu)，會加(jiā)⼊凍⼲保護劑，如(rú)海藻(zǎo)糖
，蔗糖
，乳糖
，⽢露(lòu)醇(chún)等。前期(qī)研究表(biǎo)明，⽢露醇作為(wéi)凍(dòng)⼲保(bǎo)護劑時保(bǎo)護效果較差(chà)
，粒⼦易(yì)聚集;乳(rǔ)糖作為(wéi)凍⼲保護劑時(shí)的(dí)保護效果與(yǔ)蔗糖相(xiāng)近，但(dàn)部分患者(zhě)的乳糖(táng)耐受性(xìng)較(jiào)差;海(hǎi)藻(zǎo)糖(táng)屬於(yú)注(zhù)射級輔料，作(zuò)為(wéi)凍⼲保護劑時(shí)保護(hù)效(xiào)果也較(jiào)好，但(dàn)價格較(jiào)⾼。綜上所述，本(běn)研(yán)究選⽤蔗糖為(wéi)凍⼲保護(hù)劑，以凍(dòng)⼲產品(pǐn)的(dí)外(wài)觀(guān)
，⽔分
，復溶(róng)再分散時間(jiān)(t再(zài)分(fēn)散(sàn)，指凍⼲產品完(wán)全溶(róng)解(jiě)所(suǒ)⽤時間(jiān)) 為(wéi)評價(jià)指標(biāo)，考(kǎo)察(chá)蔗糖與磷脂(zhī)的(dí)質(zhì)量⽐對凍(dòng)⼲產品質(zhì)量(liáng)的影響(xiǎng)。

凍幹工藝(yì)優(yōu)化(huà)

　　冷(lěng)凍⼲燥(zào)過程包(bāo)括(kuò)預(yù)凍和⼲燥(zào)。為(wéi)了降低(dī)能耗(hào)
，提⾼效(xiào)率(shuài)，本(běn)研(yán)究從預凍階段(duàn)降(jiàng)溫(wēn)速度(dù)
，⼀次⼲燥(zào)溫度
，⼆次⼲燥溫度3個⽅⾯對(duì)凍(dòng)⼲⼯藝進⾏研(yán)究(jiū)與優化，以(yǐ)縮短凍⼲周期。

　　2.1 預(yù)凍階段(duàn)

　　預(yù)凍階(jiē)段中料液(yè)的(dí)凍結程度或狀態會(huì)直(zhí)接(jiē)影響(xiǎng)後(hòu)續⼲燥過程的效率和產品(pǐn)質(zhì)量(liáng)，依(yī)據1納⽶脂(zhī)質體(tǐ)混懸液的(dí)共晶點，將預凍溫(wēn)度(dù)設(shè)為 –40 ℃。采⽤電阻法(fǎ)判(pàn)斷(duàn)樣品(pǐn)的(dí)凍結(jié)程(chéng)度，考察隔(gé)板(bǎn)從(cóng)室溫降(jiàng)到-40 ℃所⽤時(shí)間(jiān)(t1)對凍⼲脂(zhī)質體(tǐ)產品質(zhì)量的影響(xiǎng)。

　　2.2 ⼀次⼲燥(zào)階段(duàn)

　　⼀次(cì)⼲燥(zào)⼜稱升華(huá)⼲燥，主要⽬的是除去(qù)產品中的⾮結合(hé)⽔。該階(jiē)段的主(zhǔ)要(yào)⼯藝參數(shù)是升華⼲燥溫度和(hé)⼲燥時(shí)間(t升，指從(cóng)⼀次⼲燥(zào)開始(shǐ)到(dào)⽔綫完(wán)全(quán)消失及之後繼續保溫2 h的總時(shí)⻓)。依(yī)據1納⽶脂質體(tǐ)混(hùn)懸液的共熔(róng)點(diǎn)，分(fēn)別(bié)選(xuǎn)擇-15℃和(hé)-10℃作為升華(huá)⼲燥溫度(dù)進(jìn)⾏考察。設計(jì)⼀次⼲燥⽅案(àn)如表所(suǒ)⽰，記錄⽔綫消(xiāo)失時間，並(bìng)對製(zhì)得的凍⼲產品的外觀
，t 再分散
，⽔分含(hán)量(liáng)等(děng)指標(biāo)進(jìn)⾏評價(jià)。

　　2.3 ⼆次⼲燥階段

　　⼆次⼲燥(zào)⼜稱解析(xī)⼲燥(zào)，主要⽬的(dí)是(shì)去(qù)除在(zài)⼀次⼲燥(zào)中⽆法(fǎ)去除的(dí)
，未凍(dòng)結的部分吸附⽔和(hé)結合(hé)⽔，其⼲燥效果主要(yào)受⼲燥溫(wēn)度(dù)影(yǐng)響。由於(yú)實(shí)驗室⽇常溫度約為(wéi)24℃，為了(liǎo)避免出箱(xiāng)溫度低於環(huán)境(jìng)溫(wēn)度(dù)⽽使空⽓中(zhōng)的(dí)⽔分(fēn)凝(níng)結(jié)在(zài)產品(pǐn)上導致(zhì)產(chǎn)品(pǐn)吸(xī)濕，將⼆次(cì)⼲燥溫度設(shè)置(zhì)在 24℃以上(shàng)。同時，結(jié)合(hé)輔料的熱穩(wěn)定性，考察了⼆次⼲燥(zào)溫度(dù)分(fēn)別(bié)為(wéi)25℃和28℃對凍(dòng)⼲產(chǎn)品質量的(dí)影(yǐng)響。記(jì)錄⼲燥(zào)終點，並(bìng)對(duì)凍(dòng)⼲產品的外觀
，t再分(fēn)散(sàn)
，⽔分(fēn)含(hán)量(liáng)及室溫 (放(fàng)置(zhì)24 h)和(hé)4℃ (放置48 h)下穩(wěn)定(dìng)性 (粒徑(jìng)
，PDI
，pH值(zhí)) 進⾏評價。

實驗(yàn)結果

凍幹保(bǎo)護(hù)劑的選擇(zé)及用量(liáng)

　　可(kě)⻅，當(dāng)m糖/m脂(zhī)=5.0或(huò)7.5時，凍(dòng)⼲產(chǎn)品(pǐn)表(biǎo)⾯平整
，⽆塌(tā)陷，但(dàn)m糖(táng)/m脂(zhī)=7.5時(shí)，產品(pǐn)中(zhōng)⽔分含量較⾼，約為m糖/m脂(zhī)=5.0時產(chǎn)品的3倍，因(yīn)此，選(xuǎn)擇m糖(táng)/m脂(zhī)=5.0 進(jìn)⾏後續研究(jiū)。

凍(dòng)幹(gān)工藝(yì)優化

　　2.1 預凍階段

　　試驗(yàn)結(jié)果表明(míng)，當(dāng)t1=20 min 時(shí)，凍⼲產品的(dí)顆(kē)粒較(jiào)細膩 ;當(dāng)t1=90 min 時，凍(dòng)⼲產品(pǐn)的顆粒較粗糙;於-40℃保(bǎo)持3 h時(shí)，電阻值(zhí)較⼤，此(cǐ)時1納(nà)⽶脂(zhī)質體(tǐ)混懸(xuán)液(yè)完(wán)全(quán)凍實，繼續在(zài)-40℃保(bǎo)持(chí)2 h後(hòu)，進⼊升華(huá)⼲燥(zào)階段。由於粒(lì)⼦細膩的(dí)凍(dòng)⼲脂(zhī)質體產品引濕性(xìng)較強(qiáng)，不(bù)利於保存(cún);並且(qiě)降溫速度(dù)過快(kuài)易形成較多粒(lì)徑較⼩的冰(bīng)晶⽽損傷脂質體(tǐ)膜(mó)，⽽慢速(sù)降(jiàng)溫(wēn)則可形成較⼤的冰晶(jīng)，可(kě)避免破(pò)壞(huài)脂(zhī)質(zhì)體膜。此外，縮(suō)短隔板降溫(wēn)時間(jiān)對(duì)凍(dòng)⼲機的性能要求較⾼，且在(zài)⼲燥(zào)過程(chéng)中需要更多(duō)的能量才(cái)能(néng)達(dá)到預(yù)期(qī)的⼲燥效(xiào)果(guǒ)，因(yīn)此(cǐ)設置(zhì) t1=90 min。 綜上所(suǒ)述，優(yōu)化後預凍階(jiē)段⼯藝參(cān)數為：預(yù)凍溫(wēn)度-40℃，t1=90 min，隔(gé)板降(jiàng)溫到-40℃時(shí)，保溫時間(jiān)(t2)=5 h。

　　2.2 ⼀次(cì)⼲燥階段

　　結果顯⽰，⽅案①所得(dé)凍(dòng)⼲產(chǎn)品呈⽩⾊花籃狀(zhuàng)，表⾯塌陷嚴重(zhòng)，不(bù)符(fú)合1納(nà)⽶脂質體凍⼲粉(fěn)的外(wài)觀要求，且(qiě)復(fù)溶(róng)性(xìng)差 ;⽽⽅案②所(suǒ)得1納⽶脂質(zhì)體凍(dòng)⼲粉(fěn)緊(jǐn)貼(tiē)瓶壁，呈疏鬆的(dí)⽩⾊圓(yuán)柱(zhù)形塊(kuài)狀(zhuàng)物(wù)，表⾯平整，其⽔綫消失時間為12 h，t再分散=20 s，⽔分(fēn)含量為1.0%，貯存(cún)穩定性良(liáng)好，且(qiě)包封率較⾼ (表(biǎo)3)。因此(cǐ)本(běn)研(yán)究將(jiāng)升華⼲燥(zào)溫(wēn)度(dù)設為-15℃，t升(shēng)設為14h。

　　2.3 ⼆次(cì)⼲燥階(jiē)段(duàn)

　　結(jié)果如(rú)表4所⽰，⼆次⼲燥(zào)溫度(dù)為25或28℃時，所得凍⼲產品的(dí)外觀(guān)均為(wéi)緊(jǐn)貼瓶(píng)壁的(dí)⽩⾊圓(yuán)柱形(xíng)疏(shū)鬆(sōng)塊(kuài)狀物，表(biǎo)⾯平整
，⽆塌(tā)陷，且t再分散(sàn)均為20 s，⽔分含量(liáng)均(jūn)低於2%，其(qí)他各(gè)項評(píng)價指標(biāo)均(jūn)相近(jìn)且表現(xiàn)良(liáng)好。⼆次(cì)⼲燥(zào)溫(wēn)度為25和(hé)28℃時，到達⼲燥(zào)終點所需時(shí)間分別為61.50和48.83 h，t解(jiě)分別為(wéi)40.67和(hé)28.00 h。為(wéi)了(liǎo)節(jié)約時間(jiān)
，減少能耗(hào)，本研(yán)究將解析⼲燥(zào)溫(wēn)度設(shè)為28℃，解(jiě)析⼲燥時間(jiān)設(shè)為(wéi)28 h，凍⼲全(quán)程總耗時(shí)為48.83 h。

優化的(dí)凍(dòng)幹工(gōng)藝

　　綜(zōng)上所(suǒ)述(shù)，優化凍(dòng)⼲⼯藝為：蔗糖與(yǔ)磷(lín)脂的質量(liáng)⽐為(wéi)5.0;脂(zhī)質體(tǐ)中卡(qiǎ)巴他賽(sài)質量濃度為2mg/mL，規格為(wéi)每瓶20mg;⻄林(lín)瓶選⽤20或30mL的規格(gé)，當(dāng)⻄林瓶(píng)規格為(wéi)20mL時，料液與(yǔ)⻄林(lín)瓶體(tǐ)積⽐為(wéi) 1 ∶ 2，當⻄林(lín)瓶規格(gé)為30 mL時，料(liào)液(yè)與⻄林瓶體積(jī)⽐為(wéi)1 ∶ 3;采(cǎi)⽤階段式(shì)升溫(wēn)，凍⼲曲綫如圖1所(suǒ)⽰，預凍溫(wēn)度為(wéi)-40℃，隔板(bǎn)降溫(wēn)時(shí)間為(wéi) 90 min，-40℃時保(bǎo)溫5 h;⼀次⼲燥溫為-15℃，⼀次⼲燥(zào)時間為(wéi)14 h;⼆次(cì)⼲燥溫度為(wéi)28 ℃，⼆次⼲燥時(shí)間(jiān)為(wéi)28 h。