研(yán)究摘(zhāi)要

　　副溶(róng)血弧(hú)菌(jūn)是導致食(shí)用(yòng)海鮮後胃腸(cháng)炎爆發的(dí)主要致(zhì)病(bìng)菌之(zhī)一
。環二(èr)鳥苷(gān)酸(c-di-GMP)是廣(guǎng)泛(fàn)存(cún)在(zài)於(yú)細菌中的(dí)第二信使，可控(kòng)製(zhì)多種細菌(jūn)行為，包括致病機製(zhì)，生物(wù)膜(mó)的形(xíng)成和運動能力
。而(ér)GefB蛋(dàn)白(bái)(VPA1478)以(yǐ)存在GGDEF結構域(yù)為(wéi)特征(zhēng)，可抑(yì)製副(fù)溶(róng)血(xiě)弧(hú)菌的群集(jí)運(yùn)動能(néng)力(lì)
。研究發(fā)現，刪除了GefB基(jī)因的(dí)副(fù)溶血(xiě)弧菌產生了(liǎo)一係(xì)列(liè)的(dí)顯著(zhù)變(biàn)化：c-di-GMP水(shuǐ)平(píng)下(xià)降(jiàng)，生物(wù)膜形成(chéng)減(jiǎn)少，而(ér)遊(yóu)泳(yǒng)和群(qún)集運動(dòng)能力(lì)卻得到了(liǎo)增強
。進(jìn)一(yī)步研(yán)究發(fā)現，GefB不(bù)僅(jǐn)參(cān)與了鞭毛相(xiāng)關(guān)基因(yīn)的抑(yì)製(zhì)，還激(jī)活(huó)了那些負(fù)責胞(bāo)外多(duō)糖(táng)產生的(dí)基(jī)因(yīn)
。值(zhí)得注意(yì)的是(shì)，GefB與其相鄰(lín)基因(yīn)VPA1477共同構(gòu)成一個(gè)名為vpa1477-gefB的轉錄(lù)單元，並(bìng)且(qiě)這個單(dān)元受(shòu)到兩(liǎng)種(zhǒng)群體(tǐ)感應(yīng)調節劑AphA和OpaR的(dí)協(xié)同控(kòng)製(zhì)
。具(jù)體來(lái)說(shuō)，在(zài)細(xì)菌(jūn)細(xì)胞密度較低的(dí)情(qíng)況(kuàng)下，AphA會(huì)促進(jìn)vpa1477-gefB的表(biǎo)達;而在高細(xì)胞密度(dù)條件下(xià)，OpaR則(zé)起到(dào)抑(yì)製作(zuò)用
。這(zhè)一係列研究(jiū)成(chéng)果為我們(mén)深(shēn)入理解副溶血弧菌內(nèi)部復(fù)雜的(dí)c-di-GMP代謝網絡(luò)及其(qí)調控(kòng)機製(zhì)提供了(liǎo)寶貴的綫索
。

MGC係(xì)列微生(shēng)物生(shēng)長曲綫分(fēn)析儀(yí)的(dí)應(yīng)用(yòng)

　　為了確定(dìng)GefB基(jī)因(yīn)缺失是否會對副溶(róng)血(xiě)弧(hú)菌(jūn)的生(shēng)長(cháng)產(chǎn)生影響，研究人(rén)員(yuán)使用(yòng)了MGC-200微生(shēng)物(wù)生(shēng)長曲(qū)綫(xiàn)分(fēn)析(xī)儀(yí)進行實(shí)驗
。

　　實(shí)驗(yàn)中(zhōng)，副溶血弧(hú)菌RIMD2210633在(zài)心浸(jìn)液(yè)肉湯(tāng)中培(péi)養至OD600達到1.4，然後(hòu)將該(gāi)菌液作為(wéi)種(zhǒng)子(zǐ)菌(jūn)液(yè)，以(yǐ)1：1000的比例接(jiē)種到心浸液(yè)肉(ròu)湯或(huò)者(zhě)海生(shēng)菌肉湯中，然(rán)後分裝到96孔(kǒng)細(xì)胞培養板，每(měi)孔(kǒng)含有(yǒu)200μL菌(jūn)懸液，每個菌株設(shè)置12個生物(wù)學重復，37℃培養(yǎng)
。MGC-200每(měi)30分(fēn)鐘自動檢測一次OD600值(zhí)，以監測細(xì)菌(jūn)的(dí)生長情況(kuàng)
。

　　研究(jiū)發(fā)現無論在(zài)下心浸液(yè)肉湯(tāng)(圖(tú)A)還(huán)是在(zài)海生菌肉湯(圖(tú)B)中，野(yě)生(shēng)型(xíng)(WT)和(hé)GefB基(jī)因缺(quē)失(shī)(ΔgefB)的(dí)副溶(róng)血(xiě)弧(hú)菌的生長率沒有明顯(xiǎn)差異，這(zhè)表明GefB基(jī)因(yīn)的缺失(shī)不(bù)會直(zhí)接(jiē)影(yǐng)響副溶(róng)血弧(hú)菌的基本生長(cháng)特(tè)性
。

結論

　　MGC係(xì)列微(wēi)生(shēng)物生(shēng)長(cháng)曲綫分析儀具有氣體環境(jìng)監(jiān)控(kòng)，高(gāo)通(tōng)量(liáng)培養，全自動檢測以及實(shí)時顯(xiǎn)示(shì)生長曲(qū)綫等(děng)的功(gōng)能，整個過程無需(xū)人(rén)工(gōng)頻繁取樣(yàng)，也(yě)無需(xū)人(rén)員值守，大(dà)大降低了汙染風(fēng)險(xiǎn)，真(zhēn)正實現了(liǎo)人力的解放和研究(jiū)效(xiào)率(shuài)的(dí)提升，將(jiāng)成為(wéi)您(nín)科研路上(shàng)的得(dé)力(lì)助手
。