磺胺(àn)類(lèi)藥物是一(yī)種(zhǒng)具有(yǒu)對氨(ān)基(jī)苯磺酰胺(àn)結構的抗(kàng)生(shēng)素(sù)
，具有廣譜抗菌(jūn)效(xiào)果(guǒ)
，廣泛應(yīng)用(yòng)於(yú)畜牧(mù)生(shēng)產(chǎn)行業。過度使(shǐ)用(yòng)磺(huáng)胺類藥(yào)物飼養會通過(guò)動物食(shí)可用(yòng)組織(zhī)積累在人體內
，有嚴重副作(zuò)用和致(zhì)癌性
，對人體(tǐ)健康(kāng)造成(chéng)損害。我(wǒ)國規(guī)定所有使(shǐ)用動(dòng)物(wù)的肌(jī)肉，脂(zhī)肪肝，腎(shèn)髒食(shí)品(pǐn)中(zhōng)磺(huáng)胺(àn)類藥物的最大殘留量為0.1 mg/kg。因(yīn)此(cǐ)對於可食用動物組織中(zhōng)的(dí)磺胺類藥物殘留的(dí)檢測技(jì)術極(jí)其重要(yào)。

　　磺(huáng)胺類(lèi)藥物(wù)檢測方法(fǎ)主(zhǔ)要(yào)有液(yè)相色譜法，液相(xiāng)色(sè)譜(pǔ)-串(chuàn)聯質(zhì)譜(pǔ)法(fǎ)，酶(méi)聯(lián)免疫發等。其中2014年(nián)農質(zhì)發發布的檢測(cè)方法中(zhōng)以高(gāo)效(xiào)液(yè)相色譜法(fǎ)為(wéi)檢測標準(zhǔn)
，目前許多檢(jiǎn)測實驗(yàn)室(shì)開發(fā)了液(yè)相(xiāng)色譜(pǔ)-串(chuàn)聯(lián)質(zhì)譜(pǔ)法進行(háng)樣品中磺胺類(lèi)藥物的(dí)殘(cán)留
，提高了(liǎo)檢測(cè)方法(fǎ)分辨率(shuài)和(hé)檢測(cè)結(jié)果的(dí)準確性。目前(qián)以官(guān)方權威的(dí)高(gāo)效(xiào)液相色(sè)譜法為例
，對(duì)完整實驗(yàn)過程和所需試(shì)劑(jì)和儀(yí)器(qì)設備(bèi)進行(háng)介紹(shào)
，液相色譜-質譜儀聯(lián)用方法(fǎ)也會在(zài)文(wén)末補充質譜(pǔ)儀(yí)設置參(cān)數(shù)。

磺胺類(lèi)藥物殘留檢測方法(fǎ)

1.試劑(jì)配(pèi)置

　　配置95%，80%乙腈溶(róng)液(yè)(含(hán)0.2%甲酸(suān))
，配(pèi)置標(biāo)準液儲備液1mg/mL
，梯度稀釋配(pèi)置(zhì)樣(yàng)品工作液(yè)
，配置(zhì)完(wán)成後(hòu)保存。

2.樣品前(qián)處理

　　取檢(jiǎn)測樣(yàng)品和(hé)對照(zhào)樣(yàng)品利用(yòng)高速分(fēn)散器(高速匀漿機)對(duì)樣(yàng)品進行均(jūn)質(zhì)分(fēn)散
，利用超聲波(bō)細胞(bāo)粉碎機對(duì)細胞(bāo)進行(háng)進一步破碎
，完全釋放出細胞(bāo)內含(hán)物。

　　我們新芝(zhī)為客(kè)戶提供兩(liǎng)種能(néng)夠進(jìn)行組織(zhī)分散儀(yí)器(qì)
，S10手提式(shì)高速(sù)匀(yún)漿(jiāng)機(jī)以及XHF-DY高速分散(sàn)器分(fēn)別(bié)能夠(gòu)故(gù)處理小體(tǐ)積(jī)(1-120mL)和(hé)大(dà)體積(3-1000mL)處理量
，供需選(xuǎn)擇(zé)。同時提(tí)供超聲(shēng)波(bō)細(xì)胞(bāo)粉碎(suì)機SCIENTZ-IID進行(0.5-600mL樣品量(liáng))細胞(bāo)的(dí)破碎處理(lǐ)。

　　下圖是具體(tǐ)性能和(hé)參數(shù)：

3.標(biāo)準曲綫(xiàn)繪(huì)製(zhì)

　　分(fēn)別(bié)準確量(liáng)取磺胺(àn)類(lèi)藥(yào)物標準品(pǐn)工作液
，用梯度稀(xī)釋成濃度為0.05，0.1，0.5，1.0，5.0µg/mL(流動相(xiāng)稀釋)係列混合標準溶(róng)液(yè)並(bìng)進(jìn)行測量(liáng)
，繪(huì)製標準(zhǔn)曲綫

4.提(tí)取

　　稱(chēng)取(qǔ)試料5(±0.05)g於(yú)50 mL離心(xīn)管中(zhōng)
，加(jiā)入(rù)無(wú)水(shuǐ)硫酸鈉4 g
，乙腈15 mL
，以(yǐ)10000r/min以上(shàng)的(dí)速度(dù)均質(zhì)60 s後(hòu)
，以5000 r/min速(sù)度離(lí)心(xīn)5 min
，將上層(céng)溶液(yè)轉移到另一離心管中
，下層殘(cán)渣加(jiā)乙(yǐ)腈(jīng)15 mL
，渦旋(xuán)混(hùn)匀(yún)1 min
，5000 r/min速(sù)度離(lí)心(xīn)5 min
，合並兩次(cì)的上(shàng)清液於(yú)同一離心管中(zhōng)
，加正己烷(wán)10 mL
，振蕩5 min
，靜(jìng)置或離(lí)心(xīn)分層後(hòu)
，取(qǔ)下層液(yè)體(tǐ)
，加入正丙(bǐng)醇(chún)5 mL
，50℃氮(dàn)吹幹
，加(jiā)95%乙腈溶(róng)液3 mL
，渦(wō)旋混合(hé)1 min
，超聲(shēng)萃(cuì)取(qǔ)2 min
，作為(wéi)備用(yòng)液。

　　新(xīn)芝能(néng)夠為客戶(hù)提供高(gāo)速冷凍離心機HSC-2015L和HSC-3020L兩款
，其(qí)中HSC3020L是前一(yī)款的升級款。提供(gōng)DT係列(liè)的(dí)超(chāo)聲波清(qīng)洗(xǐ)機
，助(zhù)力超(chāo)聲(shēng)萃取
，提(tí)高檢(jiǎn)測準確(què)度。同時(shí)可(kě)應(yīng)用於超濾(lǜ)和(hé)液相檢測前脫(tuō)氣功能(néng)：

5.樣品淨(jìng)化(huà)

　　取95%乙腈(jīng)溶液3mL活(huó)化(huà)鹼性氧(yǎng)化(huà)鋁(lǚ)小(xiǎo)柱
，將上(shàng)述備用液(yè)全(quán)部(bù)過(guò)柱(zhù)。用95%乙腈溶(róng)液5mL滌雞心(xīn)瓶(píng)後(hòu)過(guò)柱
，不收集
，擠(jǐ)幹(gān)或負(fù)壓(yā)抽幹柱子(zǐ)裏的液體(tǐ)
，用80%乙腈溶液10mL洗(xǐ)脫(tuō)
，收集洗脫(tuō)液
，加入正(zhèng)丙(bǐng)醇5 mL後
，50℃氮(dàn)吹幹
，準確加入流動相(xiāng)溶(róng)解(jiě)2.0mL
，渦旋混合1 min
，超聲2 min
，過(guò)0.22µm濾膜後(hòu)
，取濾液上機分析。

6.測定(dìng)

　　高(gāo)效液相(xiāng)色譜參考條件

　　色譜柱： C18
，250mm×4.6mm(i.d.)
，粒徑(jìng)5µm
，或相(xiāng)當(dāng)者;

　　流動(dòng)相：乙腈-甲(jiǎ)醇(chún)-水-冰乙(yǐ)酸(2+2+9+0.2);

　　流(liú)速：1mL/min;

　　檢測波(bō)長(cháng)：270nm;

　　進(jìn)樣(yàng)量：20µL;

　　柱(zhù)溫：30 ℃

　　質譜(pǔ)儀參考條(tiáo)件(AB SCIEX API 4000+質譜(pǔ)聯用(yòng)儀)

　　電(diàn)噴霧離子源(ESI)：正(zhèng)離子電離模(mó)式;

　　去(qù)溶劑(jì)溫(wēn)度：550 °C;

　　氣簾(lián)氣(qì)壓力：172 kPa;

　　碰(pèng)撞氣(qì)壓力：41 kPa;

　　離子氣1壓力：414 kPa;

　　離(lí)子氣2壓力(lì)：379 kPa;

　　噴霧電(diàn)壓：5500 V;

　　掃描方(fāng)式：依(yī)賴保(bǎo)留時(shí)間的多反(fǎn)應監(jiān)測(scheduled MRM)

7.結(jié)果(guǒ)計算和(hé)表述(shù)

　　以上(shàng)
，就是我(wǒ)們新芝生物(wù)能(néng)為磺(huáng)胺類藥(yào)物(wù)殘(cán)留檢(jiǎn)測(cè)實驗(yàn)提(tí)供的(dí)儀(yí)器清(qīng)單(dān)
，供(gōng)需(xū)查(chá)詢(xún)。詳情(qíng)請(qǐng)登錄我們的官方網頁(yè)ichr.cn

參(cān)考文(wén)獻

　　1. 通過(guò)型(xíng)固(gù)相萃(cuì)取(qǔ)淨化(huà)-超高(gāo)效液(yè)相色譜(pǔ)-串(chuàn)聯質(zhì)譜(pǔ)法(fǎ)檢測雞(jī)肉中23種磺胺類(lèi)藥物殘留

　　2. 超(chāo)高效(xiào)液(yè)相(xiāng)色譜超高效(xiào)液(yè)相色譜串聯(lián)質譜(pǔ)法同時(shí)快速(sù)檢(jiǎn)測雞(jī)蛋中7676種藥(yào)物殘(cán)留量的(dí)研(yán)究(jiū)種藥物(wù)殘(cán)留量(liáng)的(dí)研(yán)究(jiū)

　　3. 飼(sì)料(liào)中磺胺(àn)類藥物檢測方(fāng)法(fǎ)研究(jiū)

　　4. 農(nóng)質發(fā)(2014)5號文件-磺胺類(lèi)藥物(wù)在動(dòng)物可食性組織中殘留的

　　高效(xiào)液(yè)相色譜檢(jiǎn)測方(fāng)法