研(yán)究(jiū)摘要

　　2022年8月(yuè)，湖北省(shěng)宜昌市養魚(yú)場(cháng)發生(shēng)了(liǎo)大規(guī)模黃顙(sǎng)魚死亡事件(jiàn)，研究(jiū)人(rén)員從(cóng)患病(bìng)黃顙魚體內分離出(chū)了(liǎo)一株(zhū)致病(bìng)菌，並(bìng)且(qiě)經過形態學(xué)，生理(lǐ)生(shēng)化特征以(yǐ)及16S rRNA基因(yīn)序(xù)列和係(xì)統發(fā)育分析，將(jiāng)其鑒定(dìng)為海豚鏈球(qiú)菌(Streptococcus iniae)。

　　通(tōng)過對這(zhè)株海豚鏈球菌的全基(jī)因組(zǔ)測(cè)序，研究(jiū)人員發現該菌含有一條(tiáo)長(cháng)度為(wéi)1,776,777  bp的環(huán)狀染(rǎn)色(sè)體，GC含量為37.14%。基(jī)因組序(xù)列(liè)分(fēn)析顯(xiǎn)示，這(zhè)株菌具有204個(gè)毒(dú)力相關基因和127個(gè)抗生素(sù)耐藥(yào)基因(yīn)。進(jìn)一步(bù)實驗表明，這株海(hǎi)豚(tún)鏈球(qiú)菌具有極高的(dí)致病(bìng)性，半(bàn)數致(zhì)死(sǐ)量(LD50)為9.53 × 105 CFU/g。組(zǔ)織(zhī)病理學(xué)檢查(chá)顯示(shì)，感染該(gāi)菌株後，黃顙魚的多個器官如皮(pí)膚(fū)，鰓，鰭，脾(pí)髒，肝髒，腎髒(zàng)，腸道，眼睛和大腦等(děng)部位出(chū)現了細(xì)胞大麵積變性(xìng)，壞死(sǐ)，出血和炎症(zhèng)反(fǎn)應(yīng)。

　　感染後(hòu)，黃顙魚血清中的酸性磷酸(suān)酶和鹼(jiǎn)性磷酸酶等先天(tiān)免(miǎn)疫酶活性(xìng)在24和48小時後(hòu)顯(xiǎn)著升(shēng)高(gāo)，然(rán)後(hòu)在168小時(shí)後(hòu)降低。此外，研究團隊(duì)還(huán)在(zài)感(gǎn)染後的(dí)不(bù)同(tóng)時間點檢測(cè)了(liǎo)黃(huáng)顙魚(yú)體(tǐ)內(nèi)免(miǎn)疫(yì)相關基(jī)因(yīn)的(dí)轉錄情況，發(fā)現(xiàn)這(zhè)些基因的轉(zhuǎn)錄水(shuǐ)平顯著(zhù)上(shàng)調(tiáo)，這表明宿主體內(nèi)的(dí)免疫係統在(zài)抵抗海(hǎi)豚(tún)鏈(liàn)球(qiú)菌(jūn)感染的過程中(zhōng)發揮了(liǎo)重要作(zuò)用(yòng)。

　　此次研究(jiū)不(bù)僅明(míng)確了(liǎo)海豚鏈球(qiú)菌是導致(zhì)黃顙魚大規(guī)模死(sǐ)亡的直接原因(yīn)，還提(tí)高(gāo)對海豚鏈球(qiú)菌入侵(qīn)的(dí)致病機(jī)製和(hé)宿(sù)主防御係(xì)統的認(rèn)識，為後(hòu)續(xù)的(dí)疾(jí)病防控工作(zuò)提供了重要的理(lǐ)論依據(jù)。

MGC係列微生物生(shēng)長(cháng)曲(qū)綫(xiàn)分(fēn)析儀的(dí)應用(yòng)

　　為(wéi)了(liǎo)更(gēng)好地(dì)理解(jiě)海豚(tún)鏈(liàn)球(qiú)菌(jūn)的生長(cháng)特(tè)性，研(yán)究(jiū)團(tuán)隊使用(yòng)了(liǎo)MGC係列微生物生長曲綫(xiàn)分(fēn)析儀MGC-200來自動檢(jiǎn)測生長(cháng)曲(qū)綫。

　　將海(hǎi)豚(tún)鏈(liàn)球(qiú)菌在(zài)BHI培(péi)養基(jī)中(zhōng)培(péi)養至OD600達到(dào)1.0後(hòu)，將(jiāng)菌液以1:100的比(bǐ)例接種到不同(tóng)pH值(5.5，6.0，6.5，7.0，7.5，8.0和(hé)8.5)和不同NaCl濃度(dù)(0.5%，1.0%，1.5%，2.0%，2.5%和3.0%)的(dí)BHI培(péi)養基中，在(zài)96孔板中培(péi)養(每孔200μL)，每(měi)2小(xiǎo)時(shí)檢測一次(cì)OD600，共培養(yǎng)60小(xiǎo)時。

　　如(rú)圖A所示，分離得(dé)到的這(zhè)株(zhū)海(hǎi)豚鏈球(qiú)菌在pH 6.5～7.5之(zhī)間生長最佳(jiā)，最適pH約(yuē)為(wéi)7左右(yòu)。當pH為(wéi)6.0時(shí)，細(xì)菌(jūn)生長(cháng)遲滯期有所(suǒ)延長，當pH為5.5時，細菌(jūn)生(shēng)長(cháng)遲滯期明顯延長(cháng)，當pH為8.5時，細(xì)菌的生長(cháng)受到了(liǎo)抑(yì)製(zhì)。

　　由(yóu)圖(tú)B可知(zhī)，分(fēn)離(lí)得(dé)到的這(zhè)株海豚鏈球菌在0.5～1.5% NaCl濃度下均能正常生長(cháng)，最(zuì)適NaCl濃度為(wéi)1.0，當NaCl濃度達到2.0%時，細菌生(shēng)長(cháng)遲(chí)滯(zhì)期明顯延長，當(dāng)NaCl濃度(dù)達到3.0%時，細(xì)菌生長停止(zhǐ)。

結論(lùn)

　　MGC係(xì)列微(wēi)生(shēng)物(wù)生長(cháng)曲綫(xiàn)分析(xī)儀具有氣體環(huán)境監(jiān)控，高通量培(péi)養(yǎng)，全自(zì)動檢測以及(jí)實(shí)時顯示生長(cháng)曲(qū)綫等(děng)的功能，整(zhěng)個過(guò)程(chéng)無(wú)需人工頻繁取(qǔ)樣，也無(wú)需(xū)人(rén)員值(zhí)守(shǒu)，大大(dà)降低(dī)了汙(wū)染(rǎn)風(fēng)險(xiǎn)，真正實現了人(rén)力的解(jiě)放和(hé)研(yán)究(jiū)效(xiào)率的提(tí)升，將(jiāng)成為您科研(yán)路(lù)上的(dí)得力助手。