OD600的應用

　　OD600是(shì)指(zhǐ)在(zài)600nm波(bō)長(cháng)處的吸(xī)光度，常(cháng)常被用(yòng)於表示細菌液(yè)體(tǐ)培養液(yè)中的細(xì)菌濃度。在(zài)細菌連續(xù)培養(yǎng)過程(chéng)中(zhōng)，在不(bù)同的(dí)時(shí)間點檢(jiǎn)測菌液(yè)的OD600值，然後以時(shí)間為橫坐(zuò)標(biāo)，OD600為(wéi)縱坐標，描繪細(xì)菌的生長(cháng)曲綫。結(jié)合生長曲綫(xiàn)，可以(yǐ)評估細菌所(suǒ)處的生長(cháng)階(jiē)段，進而(ér)可(kě)以確定(dìng)合適的誘(yòu)導(dǎo)表(biǎo)達或收(shōu)獲的時(shí)間點(diǎn)。

OD600的檢測原理(lǐ)

　　菌液是一種(zhǒng)非(fēi)均相(xiāng)的懸(xuán)濁液，當入射(shè)光照射在菌液上時，光綫被細菌(jūn)(菌(jūn)體)所散射，所(suǒ)以儀器檢(jiǎn)測到(dào)的“吸光度”實(shí)際上是由(yóu)散(sàn)射和(hé)吸(xī)收(shōu)綜合作用產(chǎn)生(shēng)的(dí)，而(ér)不(bù)是如(rú)均相溶液中(zhōng)一(yī)般(bān)是(shì)由(yóu)於溶質分子(zǐ)光(guāng)吸收(shōu)引(yǐn)起的。

　　當使用(yòng)不同型號的設備來檢測(cè)同(tóng)一樣本(běn)的吸光(guāng)度時，可能(néng)會得到不同的(dí)OD600，這與(yǔ)儀器的光(guāng)路設計(jì)有(yǒu)關。儀(yí)器的檢測器與(yǔ)樣本(běn)之(zhī)間(jiān)的(dí)距離(d)和檢(jiǎn)測器的大小(R)都會(huì)對吸光度(dù)產生(shēng)影(yǐng)響。如圖2所(suǒ)示(shì)，當檢(jiǎn)測器(qì)位於(yú)d1時，散射光(guāng)可(kě)以(yǐ)被(bèi)檢(jiǎn)測器(qì)接收(shōu)到，此時吸光度較小，而(ér)當檢(jiǎn)測器位於d2時，光(guāng)不(bù)能被檢測(cè)器接收到(dào)，此時(shí)吸(xī)光(guāng)度較(jiào)大。

使用不同(tóng)的設(shè)備檢測OD600

　　不同設備(bèi)檢(jiǎn)測到(dào)的(dí)OD600不能直(zhí)接比(bǐ)較(jiào)。如圖3所(suǒ)示(shì)，使(shǐ)用(yòng)5個型號的(dí)設備(bèi)(Biomat3，ND 2000 A，ND 2000 B，Genesys，Beckman DU530)分別(bié)對不同稀釋倍數(X1，X2，X5，X10)的(dí)樣(yàng)本(běn)進行OD600檢測。結果顯示(shì)不同(tóng)的(dí)設備對同一樣本(běn)的(dí)OD600檢(jiǎn)測(cè)值不(bù)一(yī)樣(yàng)。如果(guǒ)需要比(bǐ)較不同(tóng)設(shè)備間(jiān)的OD600值，需(xū)要先確(què)定相(xiāng)同(tóng)樣品(pǐn)在不同設(shè)備上檢(jiǎn)測得到的吸(xī)光(guāng)度(dù)值之(zhī)間(jiān)的(dí)恒(héng)定(dìng)偏差或(huò)者比率，然後進行校準(zhǔn)。

　　因(yīn)此當(dāng)進行細菌菌(jūn)株(zhū)篩(shāi)選，培養(yǎng)基優(yōu)化，添加(jiā)劑(jì)評估(gū)等需要比較微生物(wù)生長(cháng)曲綫(xiàn)的研(yán)究工(gōng)作(zuò)時，最好(hǎo)選(xuǎn)擇(zé)同一(yī)型(xíng)號的設(shè)備進(jìn)行(háng)實(shí)驗，保(bǎo)證(zhèng)實(shí)驗條件(jiàn)的一(yī)致性。

　　新(xīn)芝生物(wù)MGC係列(liè)微生物生長曲(qū)綫分(fēn)析(xī)儀具有(yǒu)高(gāo)通量培(péi)養，全自動檢測，實時顯示(shì)生長曲(qū)綫的功能(néng)，將成(chéng)為您科研路(lù)上的得力助手(shǒu)。